本文標(biāo)題："TurboDoma培養(yǎng)基怎樣進(jìn)行替換?"
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如何替換Turbodoma 培養(yǎng)基？
1. 將2 x 106 cells 細(xì)胞離心 (3 min at 380 g) 后 resuspend 于 75 cm2-tissue culture flask 20 ml TurboDoma 中，后細(xì)胞密度 為1 x 105 cells/ml。
2. 密切注意培養(yǎng)狀況 ，一些案例中，由于蛋白質(zhì)突然減少，四~五天內(nèi)細(xì)胞會(huì)死亡，然而同時(shí)會(huì)發(fā)現(xiàn)一些clones也會(huì)適應(yīng)新的培養(yǎng)基而存活。
3. 細(xì)胞生長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致 pH-value下降，這時(shí)可將50%的培養(yǎng)基抽出，再添加等量新鮮培養(yǎng)基進(jìn)去。替換培養(yǎng)基的時(shí)間須視細(xì)胞代謝的速率而定。
4. 當(dāng)細(xì)胞適應(yīng)繁殖期間，可以在同一個(gè)tissue culture flask 中重複替換TurboDoma培養(yǎng)基直到一個(gè)滿(mǎn)意生長(zhǎng)狀況，因?yàn)榧?xì)胞需要 一步一步重新生長(zhǎng)和適應(yīng)于新的培養(yǎng)環(huán)境。
5. 懸浮培養(yǎng)細(xì)胞 可能會(huì)先聚集成不同大小圓形的約50個(gè)的團(tuán)狀細(xì)胞，團(tuán)狀細(xì)胞將會(huì)散開(kāi)且細(xì)胞會(huì)頃向于增殖成散開(kāi)的懸浮細(xì)胞，之后則可定期的更換培養(yǎng)液。
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